細(xì)胞外囊泡（EVs）是細(xì)胞衍生的膜結(jié)構(gòu)，主要包含外泌體和微囊泡，它們分別來自內(nèi)體系統(tǒng)并從質(zhì)膜脫落。外泌體存在于生物體液中并在細(xì)胞間通訊中起作用，允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì)，脂質(zhì)，遺傳物質(zhì)，氨基酸和代謝物。外泌體在成熟成為多囊泡內(nèi)體（MVE）的過程中在內(nèi)體腔內(nèi)產(chǎn)生為腔內(nèi)囊泡（ILV）。外泌體生物發(fā)生的機(jī)制仍然缺乏探索。

　　活性RAB31被表皮生長因子受體（EGFR）磷酸化，與脂質(zhì)筏微域中的Flotillin蛋白結(jié)合，促使EGFR進(jìn)入MVE形成ILV，這與ESCRT（運(yùn)輸所需的內(nèi)體分揀復(fù)合體）機(jī)制無關(guān)。活性RAB31與SPFH域相互作用，并通過Flotillin蛋白的Flotillin域驅(qū)動(dòng)ILV形成。同時(shí)，RAB31募集GTPase激活蛋白TBC1D2B使RAB7失活，從而防止MVE與溶酶體融合，并使ILV分泌為外泌體。這些發(fā)現(xiàn)表明，RAB31在外泌體的生物發(fā)生中具有雙重功能：驅(qū)動(dòng)ILV的形成和抑制MVE的降解，提供了一個(gè)精妙的框架來更好地理解外泌體的生物發(fā)生。

　　細(xì)胞外囊泡（EVs）是細(xì)胞衍生的膜結(jié)構(gòu)，主要包含外泌體和微囊泡，它們分別來自內(nèi)體系統(tǒng)并從質(zhì)膜脫落。外泌體存在于生物體液中并在細(xì)胞間通訊中起作用，允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì)，脂質(zhì)，遺傳物質(zhì)，氨基酸和代謝物。外泌體在成熟成為多囊泡內(nèi)體（MVE）的過程中在內(nèi)體腔內(nèi)產(chǎn)生為腔內(nèi)囊泡（ILV）。

　　通過MVE向內(nèi)萌芽形成ILV的過程主要由ESCRT（運(yùn)輸所需的內(nèi)體分揀復(fù)合體）介導(dǎo)，與許多貨物一樣，包括目前眾所周知的syndecan，tetraspanin CD63和Toll樣受體運(yùn)輸伴侶UNC93B1等，通過細(xì)胞質(zhì)尾部募集Syntenin-Alix-ESCRT-III途徑來介導(dǎo)它們ILV的形成。

　　盡管通常認(rèn)為將ESCRTIII切入MVE內(nèi)腔是必要的，但在ESCRT耗盡的細(xì)胞中仍會(huì)形成MVE內(nèi)腔中的ILV。確實(shí)，ILV生物發(fā)生的第一個(gè)ESCRT非依賴性機(jī)制被證明需要鞘脂神經(jīng)酰胺，這可能允許產(chǎn)生基于筏的微域，從而引起膜上自發(fā)的負(fù)曲率。然而，哪些蛋白質(zhì)是必需的以及它們?nèi)绾卧谶@種與ESCRT無關(guān)的ILV形成中發(fā)揮作用仍然未知。

　　在MVE與細(xì)胞表面融合至外泌體分泌之前，關(guān)鍵檢查點(diǎn)必須通過防止MVE與溶酶體融合來抑制ILV降解。積累的不可降解MVE使用常見的分泌機(jī)制進(jìn)行外泌體分泌，這主要受RAB27調(diào)控。因此，外泌體的生物合成途徑主要包括伴隨著內(nèi)體囊泡運(yùn)輸?shù)娜齻€(gè)關(guān)鍵步驟：ILV的形成，防止MVEs降解以及MVEs與細(xì)胞表面融合。在外泌體中已檢測(cè)到許多膜蛋白，這些膜蛋白與免疫反應(yīng)，病毒感染，代謝和心血管疾病，神經(jīng)退行性疾病和癌癥進(jìn)展有關(guān)，但將其調(diào)控機(jī)制仍然神秘。

　　在這項(xiàng)研究中，發(fā)現(xiàn)活性RAB31驅(qū)動(dòng)EGFR進(jìn)入MVE形成ILV和外泌體，而EGFR，也許還有其他RTK，使RAB31磷酸化以驅(qū)動(dòng)外泌體的形成。脂筏微域中的Flotillin蛋白參與了由活性RAB31驅(qū)動(dòng)的這種ILV形成，而RAB31與ESCRT機(jī)制無關(guān)。

　　進(jìn)一步證明，RAB31募集了TBC1D2B來滅活RAB7，以抑制MVE與溶酶體的融合，并使外泌體得以分泌。這些發(fā)現(xiàn)建立了由RAB31標(biāo)記和控制的ESCRT獨(dú)立的外泌體途徑，為更好地理解外泌體的生物發(fā)生提供了亮點(diǎn)。